[1]刘顺谊,殷志敏.重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达[J].南京师大学报(自然科学版),2007,30(04):74-79.
 Liu Shunyi,Yin Zhimin.Induced Expression of Recombinant Bacillus Subtilis Glutamine Synthetase in Optimized M9 Medium[J].Journal of Nanjing Normal University(Natural Science Edition),2007,30(04):74-79.
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重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达()
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《南京师大学报(自然科学版)》[ISSN:1001-4616/CN:32-1239/N]

卷:
第30卷
期数:
2007年04期
页码:
74-79
栏目:
生命科学
出版日期:
2007-12-30

文章信息/Info

Title:
Induced Expression of Recombinant Bacillus Subtilis Glutamine Synthetase in Optimized M9 Medium
作者:
刘顺谊;殷志敏;
南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046
Author(s):
Liu ShunyiYin Zhimin
School of Life Science,Nanjing Normal University,Nanjing 210046,China
关键词:
谷氨酰胺合成酶 改良M9培养基 原核表达
Keywords:
Glutamine Synthetase op timizedM9 medium p rokaryotic exp ression
分类号:
Q789
摘要:
以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.
Abstract:
The gene of Bacillus Subtilis Glutamine Synthetase ( GS EC 6.3.1.2 ) was amp lified and cloned into pET3C, then the recombinant p lasmid was transformed into BL21 (DE3). Many types ofM9 medium and LB medium were used respectively to culture the bacteria. The factors such asmedium selec tion, carbon source composition, dose of carbon source, best combination of carbon source and inducer were analyzed in detail. The exp ression efficiency of op timizedM9 medium and LB medium are almost the same, which p rovides evidence that op timizedM9 medium is a p romising rep lacement of LB medium in the industrial p roduction of recombinant Glutamine Synthetase in the future.

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
基金项目:国家教委留学回国人员基金(2002SWXSBJBC22) 、南京师范大学人才基金(2001SWXXGQB914)资助项目.
作者简介:刘顺谊(1981—) ,硕士研究生. 主要从事蛋白表达与活性的研究. E-mail: generall - r@163. com
通讯联系人:殷志敏(1963—) ,教授,博士生导师. 主要从事生物化学及细胞生物学的教学与研究. E-mail: yinzhimin@njnu. edu. cn
更新日期/Last Update: 2013-05-05